Das Produkt des Restriktionsverdaus kann leicht gelagert werden bei -20 C. Bei 4 C wäre es in Ordnung, aber um sicherzustellen, dass es keine Aktivität gibt und keine Star-Aktivität ist empfohlen, es bei -20 C zu h alten.
Wie lagert man verdaute DNA?
Versuchen Sie, die Gelscheibe über Nacht im Kühlschrank aufzubewahren, oder schmelzen Sie die Scheibe sogar in Puffer und frieren Sie sie bei -20°C oder -80°C ein. Der Abbau der DNA erfolgt mit der gleichen Geschwindigkeit und unter den gleichen Bedingungen wie lösliche DNA, verwenden Sie also eine kältere Temperatur für eine längere Lagerung.
Was bedeutet es, wenn ein Plasmid verdaut wird?
Gereinigte Plasmid-DNA wird mit 1 oder mehreren Restriktionsenzymen (REs) verdaut, die so ausgewählt sind, dass sie ein eindeutiges DNA-Bandenmuster ergeben, das leicht durch Elektrophorese aufgelöst werden kann. … Restriktionsenzyme, die innerhalb der Multiple Cloning Site (MCS) schneiden und zu einem diagnostischen Muster von 2–5 leicht aufzulösenden Banden führen, werden typischerweise ausgewählt.
Wie lagert man linearisierte Plasmide?
Wenn Sie sich Sorgen über nachgesch altete Wirkungen von TE machen, lagern Sie die DNA in einer höheren Konzentration und verdünnen Sie sie bei Bedarf oder verwenden Sie "niedriges TE", das 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. Wenn DNA oder RNA sauber ist, kann sie bei -20 °C viele Monate ohne Abbau gelagert werden.
Wie lange können Sie den Restriktionsauszug aufbewahren?
Profi-Tipp Je nach Anwendung und DNA-Menge in der Reaktion kann die Inkubationszeit zwischen 45 Minuten und über Nacht liegen. Für diagnostische Digests sind 1-2 Stunden oft ausreichend. Für Verdaus mit >1 µg DNA, die zum Klonen verwendet werden, wird empfohlen, dass Sie mindestens 4 Stunden lang verdauen.
