Was ist eine Ladekontrolle im Western Blot?

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Was ist eine Ladekontrolle im Western Blot?
Was ist eine Ladekontrolle im Western Blot?
Anonim

Ladekontroll-Antikörper sind wichtige Kontrollen, da sie die gleichmäßige Beladung der Proben in allen Vertiefungen anzeigen. Ladekontrollen zeigen auch den korrekten Transfer von Proteinen auf die Membran während des Western-Blotting-Prozesses an. Ladekontrollen sind typischerweise Proteine mit hoher und allgegenwärtiger Expression.

Was macht eine Ladekontrolle?

Eine Ladekontrolle ist ein Protein, das als Kontrolle in einem Western-Blotting-Experiment verwendet wird. … Sie werden verwendet, um sicherzustellen, dass das Protein in allen Vertiefungen gleichmäßig geladen wurde.

Warum verwenden wir eine Ladekontrolle im Western Blot?

Ladekontrollen haben eine zweite Rolle als Kontrolle in Western Blots. Sie können verwendet werden, um zu überprüfen, ob eine gleichmäßige Übertragung vom Gel auf die Membran über das gesamte Gel erfolgt ist. Dies ist unbedingt erforderlich, wenn Vergleiche der Proteinexpressionsniveaus zwischen Proben angestellt werden.

Wie benutzt man die Ladekontrolle im Western Blot?

Die Signale von Ladekontrollen werden typischerweise verwendet, um die Signale von interessierenden Proteinen zu normalisieren. Um für diese Zwecke eine Ladekontrolle zu verwenden, sollte der Nachweis mit dem Kontrollprotein-Antikörper und dem experimentellen Antikörper auf demselben Blot erfolgen. Als Ladekontrollen werden verschiedene Proteine verwendet.

Warum wird Aktin als Ladungskontrolle verwendet?

Beta-Aktin, wird üblicherweise als Ladekontrolle für Western Blot verwendetdie nachgewiesenen Proteinspiegel zu normalisieren, indem bestätigt wird, dass die Proteinbeladung im Gel gleich ist.

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