Densitometriedaten, die für Western Blots generiert werden, werden häufig verwendet, um die Proteinhäufigkeit zwischen Proben zu vergleichen. … Nichtlineare Densitometriedaten wurden beobachtet, als Western Blots mittels Infrarotfluoreszenz oder Chemilumineszenz und unter verschiedenen SDS-PAGE-Bedingungen nachgewiesen wurden.
Was ist Densitometrie-Analyse?
Densitometrie ist die quantitative Messung der optischen Dichte in lichtempfindlichen Materialien, wie Fotopapier oder Fotofilm, aufgrund von Lichteinwirkung.
Wie verwenden Sie die Densitometrie in Bild J?
Densitometrie mit ImageJ
- Klicke in die Mitte des Quadrats und ziehe es auf die nächste Bahn. …
- Wiederholen Sie den Vorgang für die letzte Spur, aber drücken Sie Strg und 3, um die letzte Spur festzulegen. …
- Verwenden Sie das Linienwerkzeug, um die Linien zu zeichnen, um den Spurhintergrund aus den Berechnungen zu entfernen. …
- Gehen Sie zu: Analyse→Gels→Label Peaks, um den Bericht zu erh alten.
Wie analysiert man Western-Blot-Ergebnisse?
Validieren Sie Ihre Quantifizierungswerkzeuge . Führen Sie beispielsweise einen Blot durch, bei dem die Bahnen mit 20 µg, 15 µg und 10 µg Gesamtprotein beladen sind. Nach der Analyse sollte die relative Quantifizierung der Zielbanden 2, 1,5 und 1 betragen. Probieren Sie verschiedene Quantifizierungswerkzeuge und -einstellungen aus, bis Sie die richtigen Ergebnisse zuverlässig reproduzieren können.
Wie quantifiziert man einen Western Blot?
Schritt 1: Bestimme den HintergrundabzugDichten Ihres interessierenden Proteins (PI) und der normalisierenden Kontrolle (NC). Schritt 2: Identifizieren Sie den NC mit dem höchsten Dichtewert. Schritt 3: Teilen Sie alle NC-Werte durch den höchsten NC-Dichtewert, um einen relativen NC-Wert zu erh alten.
