Die Sterilisation von Explantaten ist ein wichtiger Schritt bei jeder Kulturarbeit mit Pflanzengewebe, da die Entfernung aller Mikroorganismen, einschließlich Bakterien und Pilze, wesentlich ist, um eine erfolgreiche Initiierung, ein erfolgreiches Wachstum und eine erfolgreiche Entwicklung der kultivierten Gewebe zu erreichen in vitro, die sonst von den Schadstoffen überwältigt würden [2].
Was ist ein Oberflächensterilisationsmittel?
Natriumhypochlorit, das normalerweise als Wäschebleiche gekauft wird, ist die häufigste Wahl für die Oberflächensterilisation. … Es wird normalerweise auf 10 % - 20 % der ursprünglichen Konzentration verdünnt, was eine Endkonzentration von 0,5 - 1,0 % Natriumhypchlorit ergibt. Pflanzenmaterial wird in der Regel 10 - 20 Minuten in diese Lösung getaucht.
Was ist das Prinzip der Oberflächensterilisation?
Prinzip: Die Sterilisation erfolgt durch trockene Hitze bei hoher Temperatur. Bakterienzellen und Sporen sterben aufgrund von Dehydrierung.
Wie sterilisiert man Pflanzengewebekulturen?
Pflanzengewebekulturmedien werden im Allgemeinen durch Autoklavieren bei 121 °C und 1,05 kg/cm2 (15-20 psi) sterilisiert. Die für die Sterilisation benötigte Zeit hängt vom Volumen des Mediums im Gefäß ab.
Warum findet in der Gewebekultur ein Mediensterilisationsprozess statt?
Zellkulturmedien sind eine Schlüsselkomponente der vorgelagerten Bioverarbeitung, die benötigt wird, um das Wachstum und Überleben von Zellen zu fördern. Dies ist für das Erreichen von entscheidender Bedeutungeine lebensfähige Zelldichte und letztlich der gewünschte Produkttiter.