In den vergangenen Jahren verwendete Coriell ausschließlich hitzeinaktiviertes Serum für seine Zellkulturen, um das im Serum neugeborener Kälber enth altene Komplementprotein zu inaktivieren. Seit wir auf fötales Rinderserum umgestellt haben, stellen wir fest, dass die Hitzeinaktivierung für die meisten Zelllinien nicht erforderlich ist.
Wie lange wird FBS durch Hitze deaktiviert?
Das folgende Protokoll wird für die Hitzeinaktivierung von fötalem Rinderserum (FBS) vorgeschlagen. FBS wird auf 56 ± 2°C für 30± 2 Minuten im Rührwasserbad erhitzt. Hitzeinaktivierung (HI) – ein Prozess, bei dem FBS 30 ± 2 Minuten lang auf einer Temperatur von 56 ± 2 °C geh alten wird.
Warum ist für FBS vor der Verwendung eine Hitzeinaktivierung erforderlich?
Eine übliche Behandlung von FBS ist die Hitzeinaktivierung, bei der FBS 30 Minuten lang in einem Wasserbad unter gelegentlichem Schütteln auf 56°C erhitzt wird. Der Zweck ist alle Komponenten des Komplementsystems zu inaktivieren, die im FBS vorhanden sind [24], und andere potentielle unbekannte Inhibitoren des Zellwachstums.
Warum muss das Serum durch Hitze inaktiviert werden?
Ziel der Hitzeinaktivierung ist, die Komplementaktivität im Serum zu zerstören, ohne die wachstumsfördernden Eigenschaften des Produktes zu beeinträchtigen. Die Entfernung der Komplementaktivität aus dem Serum ist für die meisten Zellkulturen nicht erforderlich, kann jedoch für Kulturen erforderlich sein, die empfindlich auf die Komplementaktivität reagieren.
Wie speichert man wärmeinaktiviertes FBS?
Schützen Sie aufgetaute FBS und andere Seren durch sichere Kühlung undLagerung. Aufgetautes Serum umgehend verwenden. Flüssiges FBS und andere Seren können gekühlt (2 bis 8 °C) bis zu vier Wochen. gelagert werden