Antwort: Die Ligation fremder DNA wird an einer Restriktionsstelle durchgeführt, die in einem der beiden Antibiotikaresistenzgene vorhanden ist. Wenn eine Fremd-DNA an die SalI-Stelle des Tetracyclin-Resistenzgens in den Vektor pBR322 ligiert wird, verlieren die rekombinanten Plasmide aufgrund der Insertion von Fremd-DNA ihre Tetracyclin-Resistenz.
Wie gelangt eine fremde DNA durch biolistische Methoden in eine Pflanzenzelle?
Bei der bioloistischen Methode wird eine fremde DNA durch Hochgeschwindigkeitsbeschuss von Gold- oder Wolframpartikeln dazu gebracht, in die Pflanzenzellen einzudringen. Bei dieser Technik werden die DNA-beschichteten Partikel von einer unter Druck stehenden Kanone, der so genannten Genkanone, geschleudert, um die fremde DNA in die Pflanzenzellen einzuführen.
Wenn eine fremde DNA in das Tetracyclin-Resistenzgen ligiert wird Die Rekombinante?
Wenn ein fremdes Gen an die SalI-Stelle des Tetracyclin-Resistenzgens in den Vektor pBR322 ligiert wird, verliert die Rekombinante die Tetracyclin-Resistenz aufgrund der Insertion der fremden DNA.
Was passiert, wenn ein interessierendes Gen an der Restriktionsstelle von BamHI in den Klonierungsvektor pBR322 eingefügt wird?
Wenn ein Insert an der BamHI-Erkennungsstelle hinzugefügt wird, wird das Gen für Tetracyclin-Resistenz funktionsunfähig und die rekombinanten Bakterien mit dem Plasmid pBR322, das ein DNA-Insert bei BamHI hat, verlieren die Tetracyclin-Resistenz.
Was glaubst du, würde passieren, wenn ein fremdes Gen an die PVUI-Stelle des Plasmids ligiert wird?pBR322 von E. coli?
Wenn ein fremdes Gen an die Pvu I-Stelle des Ampicillin-Resistenzgens in den Vektor pBR322 ligiert wird verlieren die rekombinanten Plasmide ihre Ampicillin-Resistenz aufgrund der Insertion der fremden DNA.